Síntesis de novo del gen que codifica Hidrofobina I (HFBI) de Trichoderma reesei HFBI como partner de fusión a β-1,3-glucanasas. Purificación en un paso de la proteína de fusión y evaluación de su utilidad en la degradación de β-1,3-glucanos.
En esta tesis se consiguió realizar la síntesis de novo del gen que codifica la HFBI de Trichoderma reesei y confirmar su identidad mediante secuenciación. Se realizó el subclonado del gen hfbi fusionado a un linker de glicinas, seguido de las secuencias codificantes de las enzimas EgGH64 y NΔEgGH64...
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| Autor Principal: | |
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| Otros Autores: | , |
| Formato: | Tesis Libro |
| Lenguaje: | Español |
| Materias: |
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| 080 | # | # | |a 57.08 |
| 100 | 1 | # | |a García, Agustín |
| 245 | 1 | 0 | |a Síntesis de novo del gen que codifica Hidrofobina I (HFBI) de Trichoderma reesei |b HFBI como partner de fusión a β-1,3-glucanasas. Purificación en un paso de la proteína de fusión y evaluación de su utilidad en la degradación de β-1,3-glucanos. |c Agustín García ; Director Sergio A. Guerrero, Codirector Rodrigo D. Calloni |h Recurso electrónico |
| 256 | # | # | |a Datos electrónicos (1 Archivo : 9,5 MB). |
| 260 | # | # | |e Santa Fe |g 2022 |
| 300 | # | # | |a 1 cd. |b il. |c 12 cm. |
| 500 | # | # | |a Lugar de realización: Laboratorio de Enzimología Molecular. Instituto de Agrobiotecnología del Litoral (UNL-CONICET) |
| 500 | # | # | |a Disponible sólo en cd. |
| 502 | # | # | |a Tesina (Licenciatura en Biotecnología)--Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas, Universidad Nacional del Litoral, 2022 |
| 520 | 3 | # | |a En esta tesis se consiguió realizar la síntesis de novo del gen que codifica la HFBI de Trichoderma reesei y confirmar su identidad mediante secuenciación. Se realizó el subclonado del gen hfbi fusionado a un linker de glicinas, seguido de las secuencias codificantes de las enzimas EgGH64 y NΔEgGH64. Se logró expresar por primera vez en células de E. coli Shuffle (DE3) la proteína de fusión EgGH64-HFBI de forma soluble. Se confirmó que la proteína EgGH64- HFBI poseía actividad biológica, tanto para la laminarina, como para el sustrato target de la enzima en Euglena, el paramilón. Utilizando para ello el método de Somogyi-Nelson. A través de modelado molecular utilizando la herramienta bioinformática AlphaFold 2 se observo que se mantiene la estructura perteneciente al dominio GH64 y que la presencia de la HFBI no altera de forma significativa todo el dominio. Finalmente, el alineamiento múltiple de secuencia entre la GH64 de E. gracilis y otras 3 GH64 bacterianas, demostró que existen residuos catalíticos que se encuentran conservados también en la enzima de Euglena. |
| 538 | # | # | |a Requerimientos del sistema: lector de Adobe reader. |
| 650 | 0 | 7 | |a Biotecnología |2 spines |
| 653 | 0 | # | |a Tesina de Biotecnología |
| 653 | 0 | # | |a De novo |
| 653 | 0 | # | |a Euglena gracilis |
| 653 | 0 | # | |a GH64 |
| 653 | 0 | # | |a Hidrofobina |
| 653 | 0 | # | |a Cuerpos de inclusión |
| 700 | 1 | # | |a Guerrero, Sergio A. |e director de grado |
| 700 | 1 | # | |a Calloni, Rodrigo D. |e director de grado |
| 090 | |a Tes. Biotec. |b Caja 22.1 |d N° 197 |i 5505487 |u 19 | ||