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Validación de un método analítico para la extracción y determinación de enrofloxacina y su metabolito ciprofloxacina en plasma y tejidos de truchas (Oncorhynchus mykiss)

A new pre-treatment and validation of an analytical technique was applied to determine enrofloxacin and ciprofloxacin in plasma and trout tissues. Pre-treatment consisted in adding 300 μL or mg of plasma or target tissue to 300 μL of 50% trichloroacetic acid and homogenizing for 5 minutes, then keep...

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Detalles Bibliográficos
Autor Principal: Urzúa, N
Formato: Artículo revista
Lenguaje:spa
Publicado: Universidad Nacional del Litoral 2022
Acceso en línea:https://bibliotecavirtual.unl.edu.ar/publicaciones/index.php/FAVEveterinaria/article/view/11542
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spelling oai:bibliotecavirtual.unl.edu.ar:article-115422022-06-24T21:45:46Z Validación de un método analítico para la extracción y determinación de enrofloxacina y su metabolito ciprofloxacina en plasma y tejidos de truchas (Oncorhynchus mykiss) Urzúa, N A new pre-treatment and validation of an analytical technique was applied to determine enrofloxacin and ciprofloxacin in plasma and trout tissues. Pre-treatment consisted in adding 300 μL or mg of plasma or target tissue to 300 μL of 50% trichloroacetic acid and homogenizing for 5 minutes, then keeping the samples for 12 hours at 4 °C, centrifuged 30 minutes at 13,500 rpm. Regardless of the matrix analyzed, 150 μL of the supernatant were recovered and 150 μL of known concentrations of enrofloxacin or ciprofloxacin, marbofloxacin as internal standard and 600 μL of methanol were added. Finally, the samples were centrifuged for 15 minutes at 13,500 rpm, and 100 μL of the supernatant was injected into a chromatograph with a fluorescence detector set at 218 nm emission and 477 nm excitation. The isocratic elution was carried out at room temperature in reverse phase using mobile phase composed of water, acetonitrile and triethylamine. Validation of the technique included linearity tests, detection and quantification limits, intraday and interday precision, recoverability and selectivity. The method requires minimal sample pretreatment for the extraction and determination of both analytes, high precision, providing acceptable recoveries and detection limits lower than the established MRL. Se aplicó un nuevo pre-tratamiento y validación de una técnica analítica para determinar enrofloxacina y ciprofloxacina en plasma y tejidos de truchas. El pre-tratamiento consistió en agregar 300 μL o mg de plasma o tejido blanco a 300 μL de tricloroacético al 50% y homogenizar por 5 minutos, manteniendo luego las muestras por 12 horas a 4°C, centrifugado 30 minutos a 13.500 rpm. Independientemente de la matriz analizada se recuperaron 150 μL del sobrenadante y agregaron 150 μL de concentraciones conocidas de enrofloxacina o ciprofloxacina, marbofloxacina como estándar interno y 600 μL de metanol. Finalmente, las muestras se centrifugaron 15 minutos a 13.500 rpm, y 100 μL del sobrenadante se inyectaron en un cromatógrafo con detector de fluorescencia establecido a emisión de 218 nm y excitación de 477 nm. La elución isocrática se realizó a temperatura ambiente en fase reversa empleando fase móvil compuesta por agua, acetonitrilo y trietilamina. La validación de la técnica incluyó ensayos de linealidad, límites de detección y cuantificación y precisión intradía e interdía, recuperabilidad y selectividad. El método requiere mínimo pretratamiento de muestras para la extracción y determinación de ambos analitos, con elevada precisión, proporciona recuperaciones aceptables y límites de detección inferiores a los LMR establecidos. Universidad Nacional del Litoral 2022-05-24 info:eu-repo/semantics/article info:eu-repo/semantics/publishedVersion artículo Articulo info:ar-repo/semantics/artículo application/pdf https://bibliotecavirtual.unl.edu.ar/publicaciones/index.php/FAVEveterinaria/article/view/11542 FAVE Sección Ciencias Veterinarias; Vol. 20 Núm. Suplemento (2022): Resúmenes Jornadas FCV-UNL 2020 FAVE Sección Ciencias Veterinarias; Vol 20 No Suplemento (2022): Resúmenes Jornadas FCV-UNL 2020 FAVE Sección Ciencias Veterinarias; v. 20 n. Suplemento (2022): Resúmenes Jornadas FCV-UNL 2020 2362-5589 1666-938X 10.14409/favecv.v20iSuppl2. spa info:eu-repo/grantAgreement/EC/FP7/ https://bibliotecavirtual.unl.edu.ar/publicaciones/index.php/FAVEveterinaria/article/view/11542/15764 info:eu-repo/semantics/openAccess Derechos de autor 2022 Urzua http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0
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